DIN EN 16956:2017 pdf free download.Cosmetics – Analytical methods – HPLC/UV method for the identification and assay of hydroquinone, ethers of hydroquinone and corticosteroids in skin whitening cosmetic products.
2 Kurzbeschreibung
Die Probe wird mit einem Wasser/Methanol-Gemisch extrahiert und vorsichtig erwärmt, urn die im Produkt vorhandenen Verbindungen herauszulösen. Das erhaltene Gemisch wird filtriert. Die quantitative Bestimmung der in der Losung vorliegenden Verbindungen erfolgt durch Umkehrphasen-HPLC mit DAD-Nachweis (Diodenarray-Detektor, en: Diode Array Detector).
3 Reagenzien
Sofern nicht anders testgelegt, mUssen analysenreine Reagenzien verwendet werden; das Wasser muss destilliert oder von entsprechender Reinheit sein. Unter einer ,,Lösung” ist, sofern nicht anders festgelegt, eine wässrige Lösung zu verstehen.
3.1 Methanol, HPLC-Qualitãt.
3.2 Wasser, HPLC-Qualitãt.
3.3 Extraktionslösung, Methanol/Wasser (1/1). 500 ml Methanol (3.1) und 500 ml Wasser (3.2) werden in elnem 1 000-ml-Erlenmeyerkolben gemischt.
3.4 Berucksichtigte Verbindungen, siehe Tabelle 1.
3.5 Mobile Phase für die HPLC, mobile Phase A: Methanol (3.1); mobile Phase B: Wasser (3.2).
3.6 ReferenzlOsungen.
Für die Herstellung von Stammlosungen wird als Lösemittel Methanol (3.1) verwendet. Standardlosungen werden durch Verdünnen in einer Methanol/Wasser-Losung (3.3) hergesteilt.
3.6.1 Standard-Stammlosung von Hydrochinon und dessen drei Ethern (zwischen 1,2 mg/mI und 2,4 mg/mI). In elnen 25-ml-Messkolben eingewogen werden etwa: 0,03 g Hydrochinon;
— 0,04 g Hydrochinonmonomethylether; — 0,05 g Hydrochinonmonoethylether; — 0,06 g Hydrochinonmonobenzylether. Zunächst wird in 15 ml Methanol (3.1) gelost, gegebenenfalls mithilfe eines SchUttelgerats, und dann wird bis zur Kalibriermarke mit Methanol aufgefullt. Diese Lösung muss täglich frisch hergesteilt werden.
3.6.2 Standard-Stammlösungen (1 mg/mi) und Standard-Arbeitslosung von vier der am häufigsten vorgefundenen Kortikosteroide (10 pg/mI). In elnen 10-ml-Messkolben eingewogen werden separat etwa: — 10 mg Betamethasondipropionat;—10 mg Clobetasolpropionat;—10 mg Fluocinonid;—10 mg Fluocinolonacetonid;
Zunächst wird in 5 ml Methanol (3.1) gelöst, gegebenenfalls mithilfe eines Schuttelgeräts, und dann wird bis zur Kalibriermarke mit Methanol aufgefüllt. Diese vier LOsungen kOnnen bis zu 6 Monate bel 4°C gelagert werden. Anschliegend wird von vier Kortikosteroiden elne Tochterlösung in einem 100-ml-Messkolben durch Hinzufugen von 1 ml mit einer Glaspipette von jeder Standard-Stammlösung hergestelit. Es wird bis zur Marke mit dem Methanol/Wasser-Gemisch (3.3) aufgefullt. Diese Lösung kann bis zu 6 Wochen bei 4°C gelagert werden.
3.6.3 Kalibrierlosungen von Hydrochinon und dessen drel Ethern
Die Kalibrierlosungen müssen frisch hergesteilt werden (siehe Tabelle 2). Mit einer Glaspipette wird das Volumen der Standard-StammlOsung (3.6.1) in einen Messkolben überführt, und danach wird bis zur Marke mit dem Methanol/Wasser-Gemisch (3.3) aufgefullt.DIN EN 16956 pdf download.